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NEST細胞培養的培養步驟你知道嗎
點擊次數：2425 更新時間：2019-09-26
NEST細胞培養在藥理學中的應用比較廣泛。通過NEST細胞培養的生長曲線可計數細胞增長的指數，從而可以直觀地了解細胞生長與死亡的動態變化，一般用于檢測各種藥物對細胞生長的影響。利用培養細胞的放射自顯技術，研究細胞的物質代謝、動態變化和細胞周期等，對于藥物作用機制的研究有重要作用。細胞培養可用于抗動脈粥樣硬化、血糖等藥物的研究等應用。
在NEST細胞培養過程中，經常加入5%-20%的胎牛血清，常使用的BI胎牛血清濃度是10%。高濃度的血清可能改變細胞的基因表達譜，影響后續實驗的結果，我們在實驗中使用10%的BI澳洲胎牛血清培養NEST細胞，效果非常好。但是有些細胞也會使用5%的BIFBS或者20%的BI胎牛血清，要根據具體細胞選擇合適的BI胎牛血清濃度。
首先，倒掉舊的培養基，加入3ml新的培養基（有無血清的都可）洗滌一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培養基，進行預吹打，控制吹打力度，輕輕地大概沿著瓶底過一遍，然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。（巨噬細胞我們只吹打，不消化的）
其次，把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養瓶內，培養瓶事先加入培養基，放入培養箱內培養，按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次，20分鐘，30分鐘觀察一次。選擇一個時間點，已經有部分細胞貼壁的情況下，重新置于潔凈臺，底面朝上迅速倒出其中的培養基，加入3ml新培養基再輕輕洗一次。然后加入*培養基培養。后續觀察細胞生長情況以及形態。
如果一次效果還不理想，可重復多次。直到找到細胞形態。其中要注意，結合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。老化的會比較多，對后期實驗結果是不好的。所以在NEST細胞培養細胞的時候應該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題.
